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  • MSC(羊)细胞,羊骨髓间充质干细胞 传代说明
  • 点击次数:319 发布时间:【2019-07-11】
  • 细胞名称:MSC(羊) 羊骨髓间充质干细胞

    货号:C002

    种属:羊

    细胞来源:从ATCC/中科院/协和医院等地引进

    生长特性:贴壁   成纤维细胞样

    培养条件:培养基:DMEM/F12+10% FBS(推荐使用HAKATA优等胎牛血清HN-FBS-50)

    温度:37℃    

    气相:95%空气,5%二氧化碳

    传代说明:

    1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;

    2。待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:8;

    3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。

    保存说明:

    冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

    (备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)

    保存条件:液氮存储

    常见问题说明:

    1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。

    2。收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间zui长不宜超过 72 小时)

    3。细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

     

    供应商:慧颖细胞库 人源均来自于第三方str鉴定,请放心购买

    供应限制:仅供科研使用

     

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